产品货号：
ME0027
中文名称：
荧光定量PCR试剂盒(染料法)
英文名称：
DIOGHC Hifast SYBR PCR Kit
产品规格：
100T|200T|500T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒采用经化学修饰的热启动聚合酶，有效避免了非特异扩增和引物二聚体的形成，具有高度的特异性。反应缓冲液经多次优化，与热启动聚合酶具有乐观的搭配，使聚合酶的活性能够得到很大程度的发挥。反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟的时间。在20μL的反应体系里，只要有几个拷贝的DNA分子就能被检测出来。
本试剂盒具有很强的抗干扰能力，能够对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测，也能不经处理直接对菌落、血液、土壤和粪便中的靶基因进行检测分析。试剂盒以预混液的形式包装，使用极其方便。
- 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，很大程度地避免了非特异扩增；
- 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
- 抗干扰能力强，即使是血液、肿瘤、菌落等复杂样本，也能获得较为理想的结果。
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| 图1．用DIOGHC Hifast扩增GAPDH基因的一个片段，5倍系列稀释，每个反应重复1次。可见，DIOGHC Hifast具有较高的反应灵敏度，重复性好，线性范围宽。 | |
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| 图2-1．用DIOGHC Hifast与国外著名供应商T的sybr green Kit扩增GAPDH基因一个片段的扩增曲线，模板量一样，每个反应重复3次。可见，DIOGHC Hifast具有酶动力强，灵敏度高，CT值较早，扩增曲线典型等优势。 | 图2-2．用DIOGHC Hifast与国外著名供应商T的sybr green Kit扩增GAPDH基因一个片段的熔解曲线，模板量一样，每个反应重复3次。可见，DIOGHC Hifast重复性较好。 |
| 组分 | 100T | 200T | 500T |
| ddH2O | 1.2mL | 1.2mL×2 | 1.25mL×4 |
| 2×DIOGHC Hifast SYBR Mastermix | 1mL | 1mL×2 | 1.25mL×4 |
| 说明书 | 1份 | ||
| 成分 | 用量 |
| 2×DIOGHC Hifast SYBR Mastermix | 10μL |
| 上下游引物(10μM) | 各0.4μL |
| 模板DNA | 10ng～1μg |
| ddH2O | 至20μL |
保存：-20℃，有效期6个月。
- DIOGHC Hifast SYBR Master Mix包含dNTP Mix、Mg2+、SYBR Green I、DIOG热启动聚合酶。
- 一般来说反应体系中引物终浓度为0.2μM可得到较好的扩增效果。当反应结果不理想时，可以在0.1～1.0μM范围内调整引物浓度。
- qPCR反应灵敏性高，模板量的准确性对结果影响很大，建议将模板适度稀释后加入，或用50μL反应体系。
- 模板体积最好不超过反应体积的10%，操作过程中避免强光照射。
- 扩增产物长度请选择在100bp～500bp范围内。6、反应条件：95℃加热5分钟，以激活热启动DNA聚合酶，然后95℃ 5～15秒，60℃ 30～35秒，进行40个循环。反应条件可根据目标片段的大小、引物的Tm值等适当调整。
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